北京北纳创联生物技术研究院欢迎您

液相色谱仪测定葛根素含量

发布时间:2021-02-19 14:33 作者:陈丹
0

葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的干燥根,是常用中药材,具有解肌退热,生津,透疹,升阳止泻功效,用于外感发热头痛、项背强痛,口渴,消渴,麻疹不透,热痢,泄泻,高血压颈项强痛等。现代研究证实,葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物,具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用,同时也有降低血压的作用。有关葛根中葛根素等异黄酮的含量测定研究已有不少报道,但对葛粉中葛根素含量测定报道不多。本文对葛粉中葛根素的提取条件和测试条件等进行比较研究,并采用液相色谱法对葛粉样品进行了定量分析, 结果令人满意。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

 LC-10tvp液相色谱仪;SPD-10T紫外检测器;N2010色谱工作站,岛津UV-265紫外分光光度仪,多功能榨汁机/搅拌机SG300-I。甲醇(色谱纯),水(二次蒸馏),其余均为分析纯。葛根素对照品(中国药品生物制品检定所);鲜葛。

1.2 色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;色谱柱Vertex C18 (150×4.6mm I.D),MeOH-H2O-HAc(30:70:0.5)为流动相,紫外检测波长250nm。

2 结果与讨论

2.1 提取溶剂浓度的选择

精密称取同一样品约0.1g,分别加30%乙醇、50%乙醇和80%乙醇10ml,超声提取60分钟,进样5ul,比较峰面积,实验结果表明30%乙醇提取。

2.2 超声提取时间的选择

精密称取同一样品约0.1g,分别加30%乙醇10ml,超声提取30分钟、45分钟、60分钟,进样5ul,比较峰面积,实验结果表明超声60分钟为zui佳提取条件。

2.3 流动相及流速的选择

试验时曾采用下述流动相进行测定:甲醇-水(25:75)、甲醇-水-醋酸(30:70:0.5)、甲醇-水(30:70)为流动相,结果采用甲醇-水-冰醋酸(30:70:0.5)为流动相,样品分离好。而流速也以1.0ml/min为合适。

2.4 标样溶液的制备

称取一定量葛根素对照品,用30%乙醇溶解配制成浓度为13ug/ml的葛根素标准液。

2.5 葛粉制备

取鲜葛用水洗净切片,称取20g放入搅拌机内,搅拌三次,每次1分钟,每次加水200ml, 150ml,100ml,合并浆汁放置二天,去掉上面的水,下面的粉浆用定量滤纸过滤,低温干燥,放入干燥器中备用。

2.6 供试品溶液制备

称取一定量葛粉于10mL容量瓶中,加30%乙醇10ml,超声提取1h,滤纸过滤,滤液过0.45um滤膜作为供试品溶液。

2.7 线性关系考察

在上述色谱条件下,分别进标样溶液0.5、3、5、7、10μl,测得各峰面积。以葛根素为横座标(A),以峰面积(Y)为纵座标,计算得回归方程:Y=3.90×106x+728.14,相关系数r=0.9999;结果紫外检测葛根素在0.0065-0.13μg范围内呈良好线性关系。

2.8 精密度试验

取上述标样溶液,连续进样5次,测定,RSD为1.11%。

2.9 重复性试验

取同一样品重复测定5次,RSD为1.61%。

2.10 稳定性试验

取上述供试品溶液,0、2、5、7、10h进样,RSD为2.1%,10小时内进样稳定。

2.11 回收率试验

取已知含量的样品,分别加入葛根素标样,按上述方法测定5次,平均回收率为98.6%, RSD为1.76%。

2.12 样品分析

精密吸取标样溶液5μl与供试品溶液5μl,注入液相色谱仪,测定,结果:葛粉中葛根素的含量为0.06%(n=3)。

3 讨论

本文采用液相色谱法测定葛粉中葛根素的含量,方法简单、快速、准确,结果满意,可用于葛粉中葛根素的含量测定。

相关链接:葛根素中药材黄酮十八烷基硅烷乙醇冰醋酸甲醇抗炎消热葛粉北纳生物

声明:本文章来源于网络,如有版权问题,请与本网联系

点赞图片

登陆后才可以评论

立即登录
推荐阅读
分享到微信 关闭-北纳生物
请设置您的密码:
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如13164239859,010-58103778

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听

关闭
大抽奖
在线客服系统
live chat