北京北纳创联生物技术研究院欢迎您

支原体清除

张宜路-会员头像-www.bnbio.com北纳生物
张宜路 2020-03-26 10:42 评论( 0 ) 浏览( 103 )

细胞培养最怕支原体污染,但有一些被污染的细胞不能被丢弃时该怎么办?今天小编把国际上惯用的一个小绝招教给你,简单有效!


如何祛除细胞上的支原体污染?


据研究表明,约98%的支原体存在于细胞表面和细胞间隙。支原体直径约180~350nm,比细胞小很多,经低速离心与细胞分离。通过反复悬浮冲洗、离心,加上使用我们的Zell Shield®,即可在细胞培养四代以内有效地祛除支原体。


什么是Zell Shield®?

Zell Shield®是一种链青霉素类复合抗生素,

对细胞影响很小,可以有效抑制细胞培养中的

支原体、细菌、霉菌、真菌等微生物增殖。

普通的链霉素、青霉素对支原体没有效果。


那为什么Zell Shield®有效呢?

因为Zell Shield®是由Minerva公司生产的专门针对支原体的抗生素。

德国Minerva公司是由全球著名的罗伯特·科赫研究所中分离出来的,专注于支原体、细菌的污染控制,尤其以支原体和军团菌的祛除、检测而闻名。Zell Shield®是Minerva公司的一项专利产品,不但对细胞培养中的细菌、真菌、霉菌有效,更是对支原体的祛除有确切效果。


具体是怎么操作呢?

1.首先把被支原体污染的细胞消化下来,

放入离心管离心,弃上清。

再加入干净的PBS悬浮冲洗细胞、

低速离心(300~500r/min)、弃上清,

反复三次。

这样可祛除细胞表面60%~70%的支原体,

支原体还剩约30%~40%.

2.细胞加入含1%Zell Shield®的新鲜培养基,

传代培养。

这时因培养基中Zell Shield®的抑制作用

细胞培养过程中,

虽然细胞增殖,但残留的支原体无法增殖。

细胞需再次传代时,把第二代细胞消化下来,

离心,弃上清。

加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清,

反复三次,

这时,细胞上残留的支原体大约已剩余为最初污染量的10%左右。

3.细胞加入含1%Zell Shield®的新鲜培养基,

传代培养。

需再次传代时把第三代细胞消化下来,

离心,弃上清。

加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清,

反复三次,

可再次祛除60%~70%的残余支原体,

通过冲洗、抑制、换液等操作,

细胞中支原体的残留污染量大约只剩3%左右。

4.细胞加入含1%Zell Shield®的新鲜培养基,

传代培养。

需再次传代时把第四代细胞消化下来,

离心,弃上清。

加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清,

反复三次,

可再次祛除60%~70%的支原体,

此时,支原体残留量大约已低于1%.


支原体的增殖亦有密度要求,

用Zell Shield®处理过四代的细胞,

即便撤掉Zell Shield®,

只要保证没有新的支原体人为再次带入,

原有支原体也无法再增殖,

随着传代,换液,支原体的老化、死亡,

细胞中的支原体污染基本就彻底解决了。


敲黑板,划重点啦


1.每次传代时,重复三次对细胞悬浮冲洗步骤非常重要,操作要正确、规范,以达最佳效果!


2.在培养基中加入1%Zell Shield®抑制支原体增殖!


3.使用安全的血清、培养基等试剂,不再有新的支原体加入!


做到以上三点即可确保祛除支原体污染。


Zell Shield®工作原理是什么?

支原体祛除剂Zell Shield®(培养基用)

是一种即用型链青霉素类的复合抗生素,

在培养基中1%的浓度

通过阻止原核生物DNA及蛋白的合成,

抑制细胞培养中遇到的

细菌、真菌、霉菌增殖,

更可以有效、精确地抑制支原体增殖,

且对细胞基本安全。

点赞图片
  • 暂无回复...

登陆后才可以评论

立即登录
发表评论
楼主动态
  • 暂无数据
分享到微信 关闭-北纳生物
请设置您的密码:
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如13164239859,010-58103778

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听

关闭
大抽奖
在线客服系统
live chat