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细胞转移实验服务

肿瘤转移是恶性肿瘤生物学特征之一,在肿瘤转移过程中的某些阶段,肿瘤细胞表现出较强的运动能力,如肿瘤细胞从原发灶分离,进而侵入到邻近组织及再穿过血管壁进入血液循环和穿出血管壁进入继发部位等,因而细胞运动性研究在肿瘤细胞侵袭和转移的机制研究上有重要作用。肿瘤运动性的研究方法主要是体外检测肿瘤细胞主动移行的能力,一般有划痕实验、诱导转移(transwell)实验等。

客户需提供

1、初步实验方案

2、目的细胞或目的细胞信息

3、实验分组及方案确认

北纳将完成:

4、细胞预实验:确保实验可以按照设计方案进行

5、实验检测:根据预实验数据和客户要求进行正式实验

6、实验报告:提供原始数据和数据分析结果

 

细胞划痕

借鉴体外细胞致伤愈合实验模型,在体外培养的单层细胞上,划痕致伤,然后通过药物或者干扰手段观察肿瘤细胞迁移的能力。

北纳实例:

针对目的基因的siRNA(2)和shRNA(3)靶点病毒以及对照病毒(1)感染细胞,细胞种在培养板上,次日待细胞贴壁后用枪头均匀划伤,用PBS洗尽划痕时残余细胞,继续培养并检测细胞不同时间的划痕愈合情况,以48 h为例,观察拍照。

实验结论:降低或增加目的基因表达后,细胞运动能力减弱或增强。

基本收费:500元/板,重复3次。

注:可根据具体实验项目协商收费

 

诱导转移

将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内细胞的运动方向,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。常用有普通transwell小室(用于迁移实验)和铺有基质的transwell小室(用于侵袭实验)。

应用实例:

1、迁移实验:

迁移实验通常选择带有8.0µm微孔的聚碳酸酯膜小室,上室铺细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,细胞会向营养成分高的下室跑,定量进入下室的细胞可反映细胞的迁移能力。

实验结论:不同的方式处理细胞后,细胞的运动能力发生改变。

基本收费:500元/板,重复3次。

注:可根据具体实验项目协商收费

2 、侵袭实验

侵袭实验与迁移实验不同的是,在聚碳酸酯膜上室侧铺上一层基质胶,用以模仿体内细胞外基质,细胞欲进入下室,先要分泌基质金属蛋白酶(MMPs)将基质胶降解,方可通过,定量进入下室的细胞可反映肿瘤细胞的侵袭能力

基本收费:500元/板,重复3次。

注:可根据具体实验项目协商收费