主页 > 科研服务 > Real-time PCR技术服务
Real-time PCR技术服务

原理:

实时荧光定量PCR技术(Real-time PCR)借助于荧光信号的变化实时检测PCR产物,一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确确定CT值,通过CT值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析。

流程:

1、设计合成引物

2、RNA 抽提及检测

3、cDNA制备

4、标准曲线制备

5、Real-time PCR扩增

6、数据分析

实验要求:

1.客户需自备引物,亦可委托本公司设计合成。

2.标本尽可能新鲜;标本量:组织块≥150mg;细胞数≥1×107。

3.实验室不接受RNA样品,或者客户有证据证明样品不存在污染和讲解。

标本收集及注意事项:

血液样本:

用抗凝管收集4-5ml的新鲜血样,加入淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,加入trizol或者直接冻存到-80度或者液氮中

细胞:

1、悬浮细胞:低速离心,收集细胞。保存同上

2、贴壁细胞:胰酶消化或者细胞刮刀,然后离心,收集细胞。保存同上

组织:

离体时间尽量不超过15分钟,用锡箔纸包埋或者放入冻存管中,先放入液氮中速冻几个小时或者过夜,再放入-80度冰箱或液氮保存

实验结果及数据:

收到标本后20-30个工作日之内提交实验结果,实验结果以数据和图片的形式提交给客户。

基本收费:

160 元/标本/基因(3次平行反应),内参及引物设计和合成免费

注:样本处理另行收费,特殊要求费用需协商。